Z6·尊龙凯时团队在生物医疗领域的创新不断推动技术进步。近年来,斑马鱼Crispant技术作为基因编辑的重要里程碑,因其高效、低成本和操作简便的优势,已成为研究疾病机制、药物筛选及功能基因组学的理想工具,并有望在精准医疗中发挥更大的效果。
Crispant技术概述
Crispant定义是通过CRISPR/Cas9技术,将Cas9蛋白和靶点gRNA混合(RNP)注射入斑马鱼的一细胞阶段,获得的F0代基因敲除嵌合体斑马鱼(整体敲降),这使得研究者能够直接进行表型观察和基因功能研究。
Crispant技术的优势
相比于传统的m啡啉介导的基因敲降技术,Crispant具有以下几个显著优势:
- 01、周期短:最短可在2周内观察到胚胎期的表型,一般4周之内能够提供完整的研究报告,包括靶点效率验证。
- 02、任何发育阶段观察:Crispant能够在斑马鱼的任何发育阶段观察表型,而m啡啉的作用随着胚胎发育逐渐减弱,只能在早期阶段有效。
- 03、毒副作用低:m啡啉容易产生毒副作用,从而引发非靶向表型;而Crispant系统以低毒副作用的方式设计多个高效且特异的靶点,能够相互验证。
- 04、同时敲降多个基因:Crispant能有效同时针对多个基因进行敲降,不会产生非特异性表型,克服了m啡啉的局限性。
- 05、便捷的稳定品系构建:Crispant筛选得到的靶点能够快速用于稳定敲除斑马鱼品系的构建,极大节省时间和成本。
应用领域
Crispant技术通过多重sgRNA协同编辑和直接筛选F0代表型,将基因功能研究的周期缩短至传统方法的1/5,同时降低成本超过50%。凭借其高效性和易操作性,已成为疾病模型构建、基因功能解析和药物筛选的关键工具。
01 疾病模型构建
研究已将Crispant技术应用于癫痫模型构建,通过敲除irf2bpl或cars2基因,成功模拟患者抽搐表现,并进行抗癫痫药物的筛选,验证了丙戊酸的效果。此外,Crispant技术还用于凝血障碍模型,通过敲除adcyap1b基因导致凝血因子的下调,表现为自发性出血,适用于抗血栓药物的评估。
02 基因功能解析
某些研究通过敲除kctd10基因诱导心脏畸形,从而推动心脏发育研究的进展;同时,通过敲除rfx6诱导糖尿病样表型,为胰腺功能研究提供了新视角。
03 药物筛选
采用Crispant技术,研究者们已通过敲除斑马鱼cars2、Sigirr、cbsb等基因,引发相关表型,应用于神经系统疾病、抗感染与免疫调节、代谢与罕见病、以及肿瘤个性化治疗等领域的药物筛选。
在健康美丽产业的CRO服务领域,Z6·尊龙凯时作为引领者,搭建了“斑马鱼、类器官、哺乳动物、人体”多维生物技术服务体系。凭借十余年的斑马鱼基因编辑技术经验,我们提供高效、系统化的Crispant技术服务,并欢迎有需要的研究者洽询。